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ACR论文前沿信息_私と日本语の勉强作文(2024年12月实时热点)

内容来源：合毅科技所属栏目：教程更新日期：2024-12-02

ACR论文

WB实验优化指南：提高效率与安全性 ### 凝胶制备的优化 𐟧ꊊ传统的WB实验中，凝胶制备是一个繁琐的过程。其实，你可以提前将去离子水、30% Acr-Bis、Tris、10% SDS、TEMED 等试剂混合在一起，保存在4Ⰳ避光的地方，有效期可达一个月或更长时间。这样，整个制胶过程就简化为了只需添加一种试剂。另外，为了方便上样，可以在上层胶中加入染料指示剂，形成预染胶。当然，你也可以选择使用商品化的制胶试剂盒，虽然价格稍高，但操作更简便。电泳缓冲液制备的优化 𐟌Š 电泳缓冲液的配方也有优化的空间。传统的配方在高电压下会出现蛋白质信号丢失的问题，而且不能明显缩短电泳时间。经过优化后的配方（Tris 38.1 mM、甘氨酸266.7 mM、HEPES 21.0 mM、SDS 3.5 mM、pH 8.3），可以在室温、200 V、35 min内完成电泳，并且高效分离小分子蛋白。300 V时仍能正常电泳，但电压过高容易产热，需要冰浴降温。建议配置5X的电泳液备用，因为1㗧”𕦳𓧼“冲液室温保存后容易发生絮凝。转膜液制备的优化 𐟌€ 在WB实验中，甲醇的毒性是一个大问题。其实，你可以用无水乙醇来替代甲醇配制转膜液。这样一来，所有需要用甲醇的地方都可以用乙醇替代（包括膜的活化和转膜液的配制）。为了自己的健康，做实验时，能用低毒或无毒的试剂替代时，一定要替代，不要因小失大！转印膜选择的优化 𐟓„ 转印膜的选择也会影响实验结果。0.45 ⵭ NC 膜比 0.45 ⵭ PVDF 膜更好地拦截蛋白质标记染料。对于小分子量蛋白，0.22 ⵭ PVDF膜的截留能力明显强于0.45 ⵭ PVDF膜和0.45 ⵭ NC膜。一直以来，0.22 ⵭ PVDF膜都是首选，因为它不会让小分子蛋白转过。凝胶切割的优化 ✂️ WB条带是论文造假的重灾区。每年都有无数论文因蛋白质条带而在PubPeer上受到质疑。渐渐地，一些期刊开始提倡使用未切割的凝胶。未切割的凝胶虽然增加了工作量，但可以确认相应分子量的目标蛋白并验证一抗的特异性。另外，条带太宽也不是什么好事，这样会增加非特异性条带的产生。通过这些优化方法，你可以提高WB实验的效率、安全性和准确性。希望这些建议对你的实验有所帮助！

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