内参和目的蛋白期刊要求解读_北京301干细胞价格表(2024年12月精选)
WB实验:内参与目的蛋白同膜共存 젗B实验,即Western blot,是一种常用的免疫印迹技术,用于检测蛋白质的存在和表达。近年来,期刊对实验的要求不断提高,尤其是内参和目的蛋白需要在同一张膜上显示。 现在,通过先进的实验技术,完全可以在同一张膜上同时显示内参和目的蛋白,甚至双带也可以与内参共存。
WB实验难?10招提高成功率! 经常做 Western blot 的朋友们,你们是否也有过这样的困惑?每次实验都像是开奖,结果总是让人捉摸不透。十个 WB 实验,七个失败,八个丑陋,九个出问题,还有一个完全不出结果。条带失踪、背景漆黑、杂带丛生……这些问题简直让人崩溃。 有时候,即使你凑齐了所有的“天时地利人和”,也不一定能得到一组完美的条带。江湖传言,一个生物学博士要跑满 1000 块胶才能顺利毕业。WB 实验本身就很难,再加上“造假”、“撤稿”、“学术不端”等丑闻,使得主流期刊对 WB 数据的要求越来越高,甚至要求作者提供原始数据和未切割的 WB 全膜条带。 对于那些出道已久的“老博士”来说,WB 的“玄学”操作早就积累了一本厚厚的攻略。今天,我就来分享一些精华内容,帮助大家提高 WB 实验的成功率,让你的条带显露真身。 跑胶是 WB 实验成败之母 提高跑胶质量的 Tips 蛋白分子量偏高或偏低 슥糖𝦘糖𖧚浓度与目的蛋白的浓度不对应。比如说,你用 12% 的胶跑 100KD 的蛋白,或者用 8% 的胶跑 20KD 的蛋白。 蛋白质降解 𑊨白质降解后很可能会在比原来位置低的地方出现主带,然后出现一些其他带。最主要的特点是所有的条带都比正常的低,并且条带模糊不清晰。 所有条带连成一片无间隔 最可能是上样量过多,其次是样品弥散(比如电泳长时间停止样品弥散)。 溴酚蓝拖尾 篸 样品溶解不好或上样前未变性完全。 纵向的纹理 上样样品中存在不溶性颗粒。 溴酚蓝很粗 𓊦𖦵缩效果不好,可能是浓缩胶太短或者配错。 在分离胶中跑不动 ️ Tris-Cl pH 值不对,或者忘记加 SDS。 一抗加成其他抗体或二抗种属加错 𐊥悦 marker 正常,其他位置没有条带,最可能是一抗加成其他抗体,或者二抗种属加错了,比如兔的加成鼠的。 解决办法 目的蛋白完全无信号,但同时做的内参是正常的,那么大部分情况是一抗抗体失效或用错二抗。 目的蛋白和内参均无信号,则考虑是否发光液失效。如果膜上没有 marker 则为转膜失败。 如果中间出现了细微条带,可能是蛋白上样量太少,或一抗浓度过低。 经验之谈 如图所展示的,一点信号都没有,大部分情况是因为抗体加错了。如果中间出现细微的条带,可能是蛋白上样量太少,一抗浓度过低,ECL 发光液失效。 希望这些小技巧能帮助大家在 WB 实验中少走弯路,提高实验成功率!ꀀ
WB新神器!科研更高效 嘿,科研界的小伙伴们!今天咱们来聊聊WB实验中的“内参”那些事儿。大家都知道,WB(Western blot)是蛋白检测的金标准,但想要做好可不容易哦!高背景、非特异性、假阳性…这些问题真是让人头疼。不过别担心,掌握好内参的使用,这些难题都能迎刃而解啦! 为什么要用内参? 在WB实验开始之前,我们通常会通过生物化学方法测定蛋白总量,确保每个孔都有等量的蛋白。内参就像是实验中的“监督员”,它能帮助我们确认所有样品都已上样,电泳是否正常工作。而且,大多数科学杂志都要求WB结果中包含内参数据哦! 如何归一化WB结果? WB是蛋白半定量的好工具。为了比较多个样品中目标蛋白的相对表达,我们需要将数据归一化。具体操作就是通过灰度值分析测定每个蛋白条带的强度,然后除以内参的条带强度。这样,我们就能更准确地比较不同样品间目标蛋白的表达变化啦! 젩择内参抗体的小窍门: 分子大小:内参蛋白的大小要和目标蛋白区分开,这样才能更准确地分析数据。 线性范围和上样量:确定样本的线性范围,避免上样量过高或过低产生的误差。 表达强度和稳定性:选择高表达且稳定的内参,比如那些由保守基因编码的蛋白。 젦熧学术平台:医学生物的AI图像分析工具! 武汉视界学术平台有什么优势? AI图像识别:强大的AI技术,让图像识别更精准、更高效。 多功能软件:覆盖Western blot、病理染色、免疫组化等多种应用(持续研发),满足你的各种需求。 数据可视化:输出精美图形和图表,让数据分析变得简单直观。 操作便捷:WB一键识别分析,WB一键统计及画图,WB三维视觉导图。 服务对象:生物学专业学生、导师、科研人员(实验室) 利用平台提供的AI算法和数据分析工具,让你的科研工作更上一层楼!科研路漫漫,有了武汉视界学术平台,图像分析不再难!快去试试吧,让你的科研工作更加高效! 希望这些小技巧能帮到大家,让WB实验变得更加顺利!记得点赞、收藏哦~ 一起在科研的道路上越走越远!
2024出彩中国少儿书画大赛报名啦!芥小朋友们,你们是不是也喜欢画画写字呢?那就赶紧来参加2024出彩中国谟槔稵吧!这次大赛可是给3-17岁的小朋友们准备的,不管你是幼儿园的小朋友,还是中小学的学生,甚至是少年宫、青少年活动中心的学员,都可以报名哦! 报名时间:2024年9月6日—2025年2月19日 作品主题:这次大赛的主题形式不限,只要不涉及宗教、政治和封建迷信,内容积极向上就行啦。你可以画自己喜欢的任何东西,比如动物、植物、风景、人物等等。 作品形式:硬笔、软笔书法、儿童画、水彩画、卡通漫画、油画、素描、速写、版画、中国画、手工、综合材料……只要你喜欢,都可以尝试! 荣誉颁发 学生荣誉: 特等奖、一等奖、二等奖、三等奖,获奖作品都会颁发荣誉证书和社会实践证书哦!特等奖作品还会在「新芽内参」期刊上发表,限量发行2000套,并且赠送全套6本期刊。 老师荣誉: 本届大赛确认领奖的老师可以获得荣誉证书,并且有机会受邀出席“ART创享领域第一届美育代表大会”,颁发指导老师奖杯。 集体荣誉: 本届大赛确认领奖的机构可以获得【美育教育先进单位】称号,并且有机会受邀出席“ART创享领域第一届美育代表大会”,颁发美育单位牌匾。 所以,小朋友们,赶紧拿起你们的画笔,开始创作吧!希望大家都能在这次大赛中取得好成绩哦!耀
全球顶级新闻发布平台揭秘! 想要了解全球新闻发布的顶级平台吗?除了美联社和法新社,还有哪些国际媒体同样不容小觑?今天就带你一起探索更多知名的新闻发布平台,让信息传播无界! 顶尖通讯社大盘点: AP(美联社):全球新闻网络的先锋。 AFP(法新社):覆盖全球的法语新闻巨头。 EFE(埃菲通讯社):西班牙语世界的新闻领导者。 Europa Press(欧罗巴通讯社):深入欧洲的新闻动脉。 TASS(塔斯社):俄罗斯的新闻传播重镇。 JIJI.COM(日本时事通讯社):日本本土与国际新闻的桥梁。 YouHap(韩联社):韩国的新闻传播先锋。 AA(土耳其阿納多盧通讯社):连接欧亚的新闻枢纽。 Bernama(马来西亚马新社):马来西亚的新闻发布中心。 Antaranews(印尼安塔拉通讯社):印尼的新闻声音。 Vnanet(越南通讯社):越南的新闻传播窗口。 ✨国际媒体平台一览: 彭博 Bloomberg:金融信息的领头羊。 商业内幕 Business Insider:商业秘闻的首选。 雅虎财经 Yahoo Finance:全球财经新闻的聚焦点。 道琼斯市场观察 Market Watch:股市动态的观察站。 华尔街内参 Streetinsider:金融界的耳朵。 商业期刊 Business Journal:独到的商业分析和报道。 CNBC:全球经济新闻的传播者。 国际财经时报 IBT:国际财经新闻的重要来源。 以上就是全球顶尖的新闻发布平台,无论是商业、财经还是国际新闻,这些平台都能提供最前沿的信息。想要跟上全球的步伐,这些平台绝对不能错过!
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