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细胞扩大培养看什么期刊解读_干细胞价格一览表(2024年12月精选)

内容来源：合毅科技所属栏目：新闻更新日期：2024-11-29

细胞扩大培养看什么期刊

女病毒学家给自己注射病毒：乳腺癌肿瘤缩小，切除后45个月未复发作为克罗地亚萨格勒布大学的病毒学家，贝塔ⷥ“ˆ拉斯在4年前得知自己乳腺癌再次复发时，决定在自己身上使用一种医学界正在研究的癌症治疗方式一病毒疗法。这种治疗方法可以避免化疗等传统治疗方法对身体带来的破坏性副作用。美国食品和药物管理局于2015年首次批准了一种溶瘤病毒疗法，即使用经过改造以专门攻击癌细胞的病毒来治疗皮肤癌。从那时起，研究团队就一直试图扩大这种疗法的可应用范围。不过，截至目前，新疗法的临床试验依然有限。据《自然》杂志最新报道，在肿瘤科医生的同意下，哈拉斯将自己作为测试对象，并与同事一起给自己注射了她本人在实验室培养的两种病毒。几周后，自制的药物使她的肿瘤缩小，外科医生对其进行了切除。在今年8月发表于《疫苗》期刊上的一篇论文中，记录了哈拉斯在自己身上做的这一实验。哈拉斯和合著者表示，这种“非常规”治疗方法使她的病情缓解了近四年。哈拉斯在2016年被诊断患有乳腺癌，随后开始化疗。在2020年病情复发后，哈拉斯和她的同事使用了自己培养的两种病毒，一种用于疫苗的麻疹病毒，以及一种影响牲畜的水泡性口炎病毒，来对其癌症进行治疗。据报道，这些病毒在约六周内，以不同的时间间隔被注射到哈拉斯的肿瘤中。治疗约11天后，哈拉斯的肿瘤开始缩小。六周注射结束后，肿瘤已缩小到可以进行手术切除。研究指出，这是一个非常好的结果一-除了有一天哈拉斯出现发烧外，治疗过程中几乎没有产生严重的副作用。外科医生切除肿瘤后，目前也未发现其体内有肿瘤扩散或生长的迹象。据报道，哈拉斯的乳腺癌自2016年确诊后复发过两次。研究称，她接受病毒疗法后，已经有45个月没有再复发。自我实验引发争议，研究具有“孤立性”。有生物伦理学家表示，哈拉斯进行了医学界一直备受争议的自我实验，其公布的结果并不能完全具备科学研究的公正。他们认为，尽管哈拉斯是唯一有资格权衡后做出这一决定的人，但她可能仍然缺乏将自己作为测试对象来进行客观研究的视角。 “从我的角度来看，自我实验从根本上来说并不违反道德，”威斯康星大学麦迪逊分校法律与生物伦理学名誉教授阿尔塔ⷦŸ姽—表示，但“这可能是不明智的。研究成果可能确实会受到(既是研究者又是患者)这样的角色带来的不切实际的期望的影响.…但我并不认为它是不道德的。” 斯坦福大学法律与生物科学中心主任汉克ⷦ 𜩇Œ利表示:“一般来说，医生医治家人或自己都被认为是一个坏主意，因为他们缺乏做好工作所必需的客观性。自我实验也是如此。” 反对该疗法的人还认为，公开哈拉斯这样的案例可能会鼓励不太合格的患者以更危险的方式进行自我实验。哈拉斯及其合著者在研究中承认，这项研究是“孤立的”，哈拉斯研究的情况也很难重复，因为“这项研究之所以可行，是因为患者也是一名病毒学专家。” 医学界认为，这样的尝试可能会带来重大的医学突破，但也可能会带来伤害甚至死亡。杰西ⷦ‹‰齐尔是19世纪研究黄热病的美国医生，他为了证明这种疾病的传播方式而让自己被蚊子叮咬，最终死于这种疾病。秘鲁医学生丹尼尔ⷥᩇŒ昂1885年感染卡里昂病后死亡，这种疾病后来以他的名字命名。

质粒转化实验全攻略：从准备到提取质粒的转化实验主要包括三个部分：感受态细胞的制备、质粒DNA的转化和质粒DNA的提取。以下是详细的步骤：（Ⅰ）感受态细胞的制备从活化的大肠杆菌（常用DH5a）平板上挑取一个单菌落，接种于3ml LB培养基的试管中，37℃振荡培养过夜。将菌悬液按照1:100的比例转接到100ml液体培养基中，37℃振荡扩大培养，2~3小时。当培养液开始浑浊时，间断性测试OD600，在数值为0.3-0.5时停止培养。将培养好的菌液转移到离心管中，冰上放置20分钟，0℃-4℃离心10分钟（4000r/min）。弃掉上清，管口倒置以便培养液弃除干净。加入0.1mol/L冰冷的氯化钙溶液30ml，小心悬浮沉淀细胞，冰浴30分钟。（氯化钙的浓度和纯度非常重要，不同批次不同厂家的产品均可影响感受态转化率） 4℃离心10分钟（4000r/min）。弃掉上清，用0.1mol/L氯化钙2ml冰浴悬浮细胞（冰上放置）片刻，感受态细胞制成。可直接用于实验，4℃保存。也可分装长期保存，加入总体积15%的灭菌甘油，-70℃条件下保存。（Ⅱ）质粒DNA的转化取100ul新鲜制备的感受态细胞，加入1ul质粒DNA混匀，同时设置对照组（未加质粒，未加受体菌，已知具有转化活性的DNA）。冷冻的感受态细胞要在冰上解冻，待管中最后一点冰融化后，迅即加入DNA。若解冻感受态细胞温度高于0℃，会降低转化效率。冰浴30分钟，离心管放到42℃保温90秒（不要摇动离心管）。冰浴时间短于30分钟，可能影响转化率。然后迅速冰浴2分钟。向离心管加800ul LB液体培养基，37℃振荡培养1小时（150r/min）。37℃生长1小时能够对于细胞恢复和抗生素抗药性表达具有最佳效果。取适当（50ul）的复苏细胞培养液，涂布在含抗性的选择性培养基上，将培养皿放置在37℃恒温培养箱中，正置30分钟。等菌液完全被培养基吸收后，倒置培养皿，在37℃恒温培养箱中，培养12~16小时，出现菌落。菌落结果：无菌落：失败或者培养条件不充分。布满菌落：呈苔样，失败。可能是抗生素浓度不够或失败。出现大菌斑，大多是由于霉菌污染所致。布满菌落：浓度太高，失败。出现菌落：符合要求。（Ⅲ）质粒DNA的提取质粒DNA的提取，由于其本身分子量小，一般采用碱裂解法提取。目前已研发出多种质粒提取试剂盒，实验操作简单，只需按照产品操作说明操作即可。

细胞培养肉与传统肉：未来谁主宰餐桌？随着全球人口的增长和新兴国家的经济发展，人类对肉食的需求也在迅速增加。根据联合国粮食及农业组织（FAO）的统计预测，到2050年，人类对肉食的需求将比2007年增长1.8倍。然而，这种需求的增加也带来了一些问题。首先，养殖牲畜需要消耗大量的饲料，而饲料的生产则需要大量的水和种植粮食的土地，这意味着全球的粮食缺口将会扩大。此外，大量牲畜体内排放的甲烷气体则会加重温室化效应，所以未来养殖食用牲畜其实完全不能满足人类日益高涨的肉食需求。为了解决这个问题，发展可循环生产的食材——细胞培养肉成为了一种解决方案。细胞培养肉是一种通过体外培养动物细胞来制造肉食的方法，具有广阔的发展前景。【植物肉与培养肉的制造难度】植物肉：通常以植物蛋白（大豆蛋白、花生蛋白、小麦面筋等）为主要原料，通过包括挤压蒸煮等现代食品加工工艺在内的热加工形成类似于肉的组织口感的食材。然而，与真实的肉相比，其口感和味道差异巨大。植物肉：用科学的手段去利用植物蛋白，将其制造成和肉类似的口感的食材。培养肉末：从动物的肉中提取细胞组织，然后进行体外培养。但是这种培养肉是多种筋细胞的集合体，无法再现原本肉的口感。例如2013年荷兰的实验室利用培养的肉末成功制作了汉堡肉，但1个汉堡肉就花费了3000万日元（约合150万人民币），高昂的生产价格一度引发公众对人造肉的讨论。培养牛排肉：这种人造肉就是通过立体再建细胞肌肉组织，从而达到牲畜肉原来的口感。而这需要将细胞相互融合，变成细长的结构，这比“培养肉末”需要更加跳跃性的技术发展。就现阶段的科学技术而言，世界上暂时还没有机构能制造出与真肉一样大小的培养牛排肉。随着科技的不断发展，细胞培养肉的生产成本也在逐步降低，未来可能会成为传统肉食的有力替代品。你更倾向于选择哪种肉食呢？是传统的养殖肉还是未来的细胞培养肉？

细胞实验的基本操作与注意事项 𐟧슧𛆨ƒž实验是生物学研究的基础，掌握一些基本操作和注意事项非常重要。下面我们来聊聊细胞复苏、冻存和传代的基本步骤以及一些需要注意的地方。细胞复苏 𐟌Š 细胞复苏其实是个技术活，步骤如下：从液氮罐中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻，时间最好控制在1分钟内。解冻后，1000rpm，4℃，离心5分钟。弃去上清液，用完全培养基重悬细胞沉淀。将细胞转移到培养瓶中，轻轻晃动使细胞分布均匀，并做好标记。在显微镜下观察细胞密度和形态，然后放入二氧化碳培养箱培养。注意事项：从液氮罐中取细胞时，记得做好个人防护，别被冻伤了。如果冻存细胞不能立即水浴解冻，可以放在干冰上保存转移。水浴解冻时间要快，做到慢冻速融。解冻后的细胞别在常温下放太久，尽快离心去除DMSO或细胞冻存液。刚复苏的细胞贴壁不牢，24小时内别频繁观察和换液。将培养瓶放入培养箱时，把瓶盖旋松一点，以便气体交换（如果用透气性瓶盖，就不用旋松瓶盖了）。细胞冻存 ❄️ 细胞冻存是为了长期保存细胞，步骤如下：等细胞达到80-90%的密度时，用胰酶消化1-2分钟。用完全培养基（胰酶体积的2倍）终止消化，1000rpm，4℃，离心5分钟。弃去上清液，加入冻存液重悬细胞。进行梯度降温，最后转移到液氮罐或-80℃冰箱保存。注意事项：选取对数生长期的细胞进行冻存，这时候细胞状态最好。冻存的细胞不宜长期放在-80℃环境中，尽快转入液氮罐中。冻存后取出一管复苏，检测细胞存活率。理论上细胞可以在液氮中长期保存，但为了稳妥起见，半年后复苏培养一次，观察生长情况再继续冻存。不同冻存液的冻存方式不一样，具体详见说明书。细胞传代 𐟧슊细胞传代是为了扩大培养规模，步骤如下：移除原液，用PBS清洗1-2次。用胰酶消化1-2分钟，完全培养基终止消化。吹散细胞，1000rpm，4℃，离心5分钟。弃去上清液，用完全培养基重悬细胞。将细胞转移到新的培养瓶中，补充完全培养基。在显微镜下观察细胞密度和形态，然后放入二氧化碳培养箱培养。注意事项： PBS润洗细胞时，从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入PBS，避免冲刷到细胞层。不同细胞的胰酶消化时间不一样，每30秒观察一次。悬浮细胞需要用未经TC处理的细胞瓶或培养皿培养，如悬浮细胞无碎片，建议按方法一传代。细胞的居住环境 𐟏 舒适无菌的环境是细胞健康生长的重要基础。不同形状、规格的培养瓶、培养皿和培养板，最终都会被转移到37℃，5%CO2的恒温培养箱中。希望这些基本操作和注意事项能帮到你，祝你的细胞实验顺利！𐟒ꀀ

细胞传代：生物科研新手的必修课 𐟧슣## 一、细胞传代的概念细胞传代是细胞培养过程中的一个关键步骤。简单来说，就是把细胞从原来的培养基中取出来，放到新的培养基里，这样可以保持细胞的活力和增殖能力。传代不仅能扩大细胞的数量，还能避免细胞因为进入平台期而停止生长甚至死亡。二、实验步骤：贴壁细胞的传代观察细胞状态：先用倒置显微镜看看细胞的形态和密度，评估一下它们的状态，这样心里有个底。紫外杀菌：提前用紫外灯杀菌30分钟，确保操作台和实验材料都干净。无菌操作：操作时要特别注意无菌，把培养皿里的旧培养液吸掉或倒掉，尽量干净，因为钙离子、镁离子和血清蛋白会降低胰酶的活力。 PBS缓冲液洗涤：可选步骤，用PBS缓冲液洗1到2次。加胰酶：加入1到2毫升的胰酶，量要刚好覆盖细胞。轻轻晃动培养皿，让胰酶充分接触细胞。建议提前把胰酶分装成适量，水浴复温到37℃。观察细胞：在显微镜下观察细胞，当细胞变圆且大多数脱落时，说明消化适度。记录下时间，供以后参考。终止消化：加入2到3毫升含血清的完全培养液，终止消化，然后轻柔吹打，让细胞完全脱落。收集细胞：将细胞悬液转移到离心管中，1500 rpm离心5分钟。低速短时间离心有助于去除细胞碎片和细菌污染。重悬细胞：弃去上清液，加入适量含血清的培养液，重悬细胞。根据细胞的生长速度、密度依赖性和传代时间等特点，按比例分装到2个或多个无菌培养皿或培养瓶中。注意细胞要充分混匀，保证分布均匀。三、实验步骤：悬浮细胞的传代悬浮细胞的传代相对简单，可以通过离心收集后，用含血清的培养基直接传代。四、注意事项严格无菌操作：这点非常重要！适度消化：提前复温胰酶到37℃，并计时消化，这样过程更稳定。消化时间过长会影响细胞状态和活性，时间过短则容易成团。轻柔吹打：吹打时要轻柔，避免细胞液的洒溅。希望这些小贴士能帮到你，祝你在生物科研的道路上越走越远！𐟚€

初中开学第一次月考，一篇搞定！嘿，同学们！开学后的第一次月考马上就要来了，是不是有点紧张？别担心，我来帮你搞定！只要你掌握了各科的学习方法，这次月考绝对不在话下。下面我给大家分享一些小技巧，保证你末尾还有惊喜哦！语文：多读多写，积累词汇和表达能力 𐟓š 语文这个东西，真的是靠积累的。平时多读一些经典文学作品、新闻报道，不仅能提高你的语感和理解能力，还能积累词汇。字词的正确使用和语法结构的规范性也很重要，多做练习题巩固基础知识吧！数学：注重思路和方法，不要死记硬背 𐟧•𐥭楏露是死记硬背的科目。做题时要注重思路和方法，学会归纳总结解题技巧，并不断进行自我挑战。利用图表和图形来辅助计算和解题，培养你的空间想象力和逻辑思维能力。英语：坚持听力和阅读，扩大词汇量 𐟓–𐟎犦䩥š持听英语广播或看英文电影，增加你的英语听力水平。同时，多读英文原版书籍和报刊杂志，扩大词汇量和阅读量。学习英语单词时要注意发音和拼写，加强口语训练。物理：注重实验操作，理解物理概念 𐟔슧‰駐†这个科目，实验操作和技术方法的掌握很重要。通过实践加深对物理概念和规律的理解。学习物理公式时要多加思考推导过程，理解其内在联系和应用场景。化学：掌握基本概念，多做实验 𐟧ꊥŒ–学的基础概念和原理一定要掌握好，多做一些实验来验证理论知识。学会运用化学方程式和图表来解决问题，提高分析问题和解决问题的能力。生物：了解基本知识和概念，多观察 𐟌𑊧”Ÿ物学的基本知识和概念要了解清楚，多观察动植物的生活习性和生长发育过程。学习生物学科的重点内容，如细胞结构、遗传变异等，并通过做实验和观察记录来加深印象。历史：学习时间轴和背景信息 𐟓œ 历史事件的时间轴和背景信息很重要，了解历史发展的脉络和文化传承。多阅读相关文献资料，了解不同时期的历史人物和事件的影响。地理：从地图入手，分析自然现象 𐟌 学习地理知识要从地图入手，了解地理位置和环境特征。注重对自然现象和社会现象的分析，培养地理思维和问题解决能力。道德与法治：理解政治概念和原理 𐟏›️ 准确理解政治概念和原理是学习政治的基础。例如，理解社会主义、民主等基本概念。熟悉并掌握重要的政治理论和思想，如马克思主义、毛泽东思想等。通过大量的阅读和写作练习，可以提高政治素养和写作能力。好了，这就是我给大家的一些小建议，希望对你们有帮助！祝大家在第一次月考中取得好成绩，末尾还有惊喜哦！𐟎‰

293T细胞培养全攻略，你掌握了吗？ 293T细胞，全名是HEK-293T，是一种经过人腺病毒5型（Ad5）转染后永生化的人胚肾细胞系。它的特点是含有并表达Ad5基因，而且比普通的293细胞更容易转染，因此被广泛用于病毒包装和基因表达研究。细胞培养要点 𐟓š 培养基选择：293T细胞专用培养基是关键。通常使用DMEM-H培养基，加入10%的胎牛血清（FBS）和1%的青霉素-链霉素（P/S）。传代比例：一般每2-3天换液一次，传代比例为1:4-1:8，传代周期大约是24-48小时。培养条件：细胞在95%空气+5%二氧化碳（CO2）的气相条件下生长，温度保持在37℃。冻存条件：细胞冻存时，推荐使用60%的基础培养基、30%的FBS和10%的DMSO，液氮储存。细胞特性 𐟔슨𔴥て€篼š293T细胞的贴壁性较差，容易飘起来。建议在培养前进行包被，或者尝试提高血清比例。增殖速度：细胞增殖非常快，通常倍增时间不到一天，隔天即可长满。聚团现象：细胞容易聚团，换液时要小心操作，避免用力摇晃培养瓶。消化与传代 𐟌€ 消化：293T细胞容易消化，但消化下来的细胞容易成团。需要吹打吹散，否则传代后细胞会成团生长，影响实验结果。传代操作：当细胞生长至汇合率达到80~90%时，需要进行传代操作，以扩大细胞数量，维持细胞良好的生长状态。注意事项 ⚠️ 随着传代次数增加，293T细胞可能会出现生长状态下降或突变等情况。因此，建议在细胞购进时就进行大量冻存，以保证实验的稳定性和持续性。通过这些细节，你可以更好地掌握293T细胞的培养技巧，为你的实验打下坚实的基础。

自制英式苦啤：7月就能喝到家的美味这次我们决定酿造一款红叔非常喜欢的英式苦啤——11B.English Best Bitter。这可是我们第一次尝试使用酵母扩培，过程相当有趣。具体操作是这样的：1包11.5克的酵母加上0.8升的自来水和79克的DME，进行2天的磁力搅拌，最终扩培到234十亿酵母细胞。在这个过程开始的同时，我们就开始制备麦汁并降温，然后把扩培好的酵母全部投入麦汁中。3天后，主发酵就完成了。接着我们升温进行双乙酰还原和熟化，月底开始冷陈，7月初灌装装瓶，到了7月中旬就可以喝啦！原料及酿造数据批次量：27升初试比重OG：1.044 终点比重FG：1.009 酒精度ABV：4.6% 苦度IBU：30 麦芽：马瑞斯奥特、慕尼黑一号、深色水晶酒花：东肯特古丁（这款酒花代表英式风格，苦味干净，香气以柔和的辛辣味为主，还带有轻微的花香、薰衣草、香料、蜂蜜、泥土、柠檬和百里香的味道）酵母：拉曼温莎Windsor（这款酵母不吃麦芽三糖，麦芽三糖约占总糖组分的10-15%，因此我们调整了工艺，从ESB降到了EBB）总结这次酿造在配方制定、酵母特性调整、工艺操作和酵母扩培方面都没有任何小瑕疵。尤其是扩培后的发酵非常猛，不到3天主发酵SG就降到1.015。随后我们升温3℃继续发酵2周。这款EBB红叔非常期待，如果你对精酿或家酿感兴趣，欢迎多多交流。不过，自酿酒有风险，请勿轻易模仿，未成年人不得饮酒哦！

𐟧짻†胞培养全攻略✨ 𐟔짻†胞培养，你准备好了吗？跟着这个攻略，一步步成为细胞培养小达人！𐟒ꊊ𐟓Œ细胞房操作注意事项： 1️⃣ 每次进出操作台，记得喷酒精消毒哦！ 2️⃣ 操作台使用前后，别忘了紫外灭菌30分钟。 3️⃣ 打开细胞培养箱时，请保持安静，不要说话。 𐟧ꨯ•剂准备大揭秘： ✅ PBS磷酸盐缓冲液：洗涤细胞的好帮手！ ✅ 细胞培养基：我们常用MESC，专为小鼠胚胎细胞设计。 ✅ 胰醇：消化细胞，轻松分离。 ✅ 中积液：终止消化，让细胞更安全。 ✅ 细胞冻存液：保存细胞活力，备不时之需。 𐟒‰细胞换液、传代、复苏、冻存全攻略： 𐟔„ 换液：吸去旧培养基，加入新培养基，让细胞焕然一新！ 𐟑𖠤𜠤𛣯𜚦𖈥Œ–细胞，分离后重新种植，扩大细胞规模。 𐟒– 复苏：从冻存状态恢复细胞活性，重获新生！ ❄️ 冻存：保存细胞活力，为未来研究打下基础。 𐟒ᥰ贴士： 1. 操作时要轻柔，避免对细胞造成伤害。 2. 定期检查细胞状态，确保健康生长。 3. 遵循无菌操作原则，确保实验结果准确可靠。现在就开始你的细胞培养之旅吧！𐟚€

𐟔즞„建质粒载体的详细指南𐟧슰ŸŒˆ质粒载体的选择：首先，选择一个具备合适限制性酶切位点的质粒载体，这些位点将用于将插入片段整合到多克隆位点中。确保插入片段中不存在这些酶切位点，以避免片段被切开。 𐟌ˆ获取插入片段：DNA可以通过提取任何细胞或组织样品获得，或者通过PCR扩增。 𐟌ˆ酶切反应：扩增完成后，使用限制性内切酶对片段和载体进行酶切。 𐟌ˆ纯化质粒和片段：酶切后，通过电泳分离片段和载体，并使用凝胶纯化回收它们。 𐟌ˆ连接DNA片段：使用DNA连接酶将插入片段连接到质粒中。连接反应中，插入片段与载体的最佳比例为3:1，以确保少量载体自连。连接反应可以在14-25℃下孵育1小时或过夜。 𐟌ˆ转化细菌：通过热激法将连接后的质粒转化到细菌中，并将转化后的细菌涂抹在含有抗生素的琼脂板上，在37℃环境中培养过夜。由于质粒包含抗生素抗性基因，成功转化的细菌在抗生素存在下会生长形成菌落。 𐟌ˆ筛选克隆：从转化板中挑选多个单克隆，接种到含有培养基且已编号的管中，在摇床培养箱中进行扩增，并纯化质粒。 𐟌ˆ鉴定质粒：使用限制性酶切割质粒，并将酶切产物进行凝胶电泳，以检查插入片段的存在。证实转化了插入片段的质粒可用于扩大培养和测序。 𐟑颀𐟔쥜覕𔤸꨿‡程中，每个步骤都需要严格控制条件和操作规范，否则可能导致失败。只要按照这个流程认真操作，相信大家都能成功构建质粒载体！

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